一種懸浮培養(yǎng)白及細(xì)胞的方法

一、成果基本信息

二、成果簡介

    本方案公開了中藥材藥物研究技術(shù)領(lǐng)域的一種懸浮培養(yǎng)白及細(xì)胞的方法，該方法中將白及種子誘導(dǎo)并繼代后得到的愈傷組織作為外植體，接種到懸浮培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，懸浮培養(yǎng)基為MS 6?芐氨基嘌呤1.5±0.45mg/L 2,4?二氯苯氧乙酸2.5±0.5mg/L 30±20g/L蔗糖；懸浮培養(yǎng)基pH為5.9±0.1；外植體接種量與培養(yǎng)基的體積比例為1/80～1/20g/mL；接種后在轉(zhuǎn)速為110±10r/min、溫度為25±2℃的黑暗條件下進(jìn)行40～50天振蕩懸浮培養(yǎng)。本方案采用細(xì)胞組織懸浮培養(yǎng)的方法，將白及種子誘導(dǎo)并繼代后的愈傷組織作為外植體進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，該方法不僅可以為細(xì)胞水平規(guī)?；囵B(yǎng)白及，進(jìn)一步為白及工業(yè)化生產(chǎn)和化學(xué)成分高效生物合成提供實驗依據(jù)和理論基礎(chǔ)。

三、成果轉(zhuǎn)化預(yù)期：白及是蘭科白及屬多年生草本植物，《中國藥典》收載白及具有止血收斂、消腫生肌的功效，可用于治療咯血、吐血、外傷出血、瘡瘍腫毒、皮膚皸裂等。作為藥效發(fā)揮的物質(zhì)基礎(chǔ)，在保護(hù)白及資源的前提下，加快白及細(xì)胞生長發(fā)育的速度以獲取更多生物量和提升藥用成分的獲取效率，是對白及質(zhì)量認(rèn)識與評價、藥理學(xué)研究、臨床應(yīng)用的基礎(chǔ)。通過建立白及液體懸浮培養(yǎng)體系，并研究其中次生代謝產(chǎn)物累積量的規(guī)律，是工業(yè)化高效生物合成有效藥用次生代謝產(chǎn)物和解決白及種質(zhì)資源短缺的有效途徑。本專利利用白及種子誘導(dǎo)出的愈傷組織作為白及液體懸浮培養(yǎng)的起始材料，建立了白及液體懸浮培養(yǎng)體系，并對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞中次生代謝產(chǎn)物累積的規(guī)律進(jìn)行了數(shù)學(xué)模型的擬合分析，一方面為后續(xù)次生代謝產(chǎn)物累積調(diào)控的研究提供研究基礎(chǔ)，另一方面也為工業(yè)化高效培養(yǎng)白及細(xì)胞并生物合成藥用活性成分奠定了實驗基礎(chǔ)，有重要的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)價值。

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